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基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： HCT15/Fu價(jià)格
簡(jiǎn)稱：人結(jié)氟尿嘧啶耐藥株

種屬：Human

來(lái)源：

培養(yǎng)基：1640+10%FBS+1%P/S +20ug/ml 5-FLU

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：CE031

使用方法：
收到細(xì)胞HCT15/Fu價(jià)格后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

無(wú)水氧化鋇，英文名或英文縮寫(xiě)：Barium oxide，級(jí)別：CP，99%，規(guī)格：25克  HumanCalretinin,CRELISA試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Paclobutrazol 10g/250g 國(guó)產(chǎn)  重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒50次

GENEPAGE6%EZSQUEEZE*CLDPAK*6% GENE-PAGE, 擠壓式瓶裝生物技術(shù)級(jí)5X75MLCOLD  Humansolubleierleukin-1receptorⅠ，IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

紫外光吸收劑UV-360 Bisoctrizolq 103297-42-1  小鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Alloxanmonohydrate阿脲一水合物25克CP  Rat heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒
葡糖酸內(nèi)酯shēng huà shì jì容量：100克  人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CollagenaseV 100mg Sigma分裝  小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 8/Neuophil collagenase,MMP-8 ELISA kit

5-胞苷二嶙酸單鈉鹽100克  乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒 ，英文名： ACC ELISA Kit

cLLTqC-1000  MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

松胞速B(-20℃) CYTOCHcLcSIN B 14930-96-  ELISAKitCETP小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白規(guī)格：48T/96T
結(jié)合珠蛋白，英文名或英文縮寫(xiě)：Haptoglobin from pooled human plasma，級(jí)別：高純，50u/mg，規(guī)格：100克  人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒 Human TGF β2 ELISA Kit

肉湯瓊脂培養(yǎng)基Broth Agar Medium  硫嘌呤S-甲基轉(zhuǎn)換酶(TPMT)ELISA試劑盒 ，英文名： TPMT ELISA Kit

COLOREDLAEMMLISTACKINGGELSOLUTION濃縮膠溶液(帶顏色)蛋白組學(xué)級(jí)透明洋紅色液體RTsigma  Ratbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA試劑盒大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-溴-2- 5-Bromo-2-fluoro,97% 93777-26-5 5G 通用試劑  HumanCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒人Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

阿米卡星/丁胺卡那霉素/阿米卡霉素/O-3-基-3-脫氧-alpha-D-葡糖基-(1→6)-O-(6-基-6-脫氧-alpha-D-葡糖基-(1→4)-N-(4-基-2-羥基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺鹽/Amikacin sulfate salt BR，674-786ug/mg 250/1000毫克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  HumanErythropoietin，EPOELISAKit人紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HCT15/Fu價(jià)格靛藍(lán)胭脂紅shēng huà shì jì容量：5克  ELISAKitP-PKC人化蛋白激酶C規(guī)格：48T/96T

D-Galacturonicacid 5g/10g/25g原裝 Fluka 48280  小鼠CD34分子(CD34)ELISA試劑盒 ，英文名： CD34 ELISA Kit

酚酞二嶙酸四鈉鹽1克保存：-20℃  大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA檢測(cè)試劑盒RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit 96T/48T

姆沙伯 G NAW ChroMosorb G NcW;  人c-fos 免疫試劑盒 Human c-fos ELISA Kit

聚乙二醇 600 Poly(ethylene glycol) 600 (PEG 600) 25322-68-3 250G 通用試劑  英文名稱MouseDPP4ELISAKit小鼠二肽基肽酶IV(DPP4)規(guī)格：96T/48T