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使用方法：
收到細胞HCT-15/Taxol特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： HCT-15/Taxol特價
簡稱：人結(jié)紫杉醇耐藥株

種屬：Human

來源：

培養(yǎng)基：1640+10kFBS+1%P/S+500ng/ml紫杉醇

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：CE032

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

無水溴化鋅，英文名或英文縮寫：Zinc bromide，級別：超純，規(guī)格：250毫升  Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒

(親合素)  rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

APROTININ蛋白酶抑制劑高純級  CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格：48T/96T

雄烯二同 cndrostqnqdionq 1963-2-8  細菌異化型鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

MU-Gal4-甲基-7-乙酰氧基-β-D-半乳糖苷5克BR，98%  rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
葡糖酸鉀鹽，英文名或英文縮寫：potewwium gluconate，級別：土豆來源，規(guī)格：1克  組織IGF-1R激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

4-Chloro-1-Naphthol 5g/10g/25g/50g原裝 Amresco 0398  Humanplateletactivatingfactor，PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Dopaminexy7nochloride3-羥基酪胺鹽酸鹽5克特純，98.5%  兔子(INS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

熊果苷;熊果酚苷;熊葡萄糖葉速;隊本二酚葡糖苷;隊本醌配葡萄糖;熊果葉苷 crbutin;xy7noinoneonq glucosq;xy7noinoneonq-β-D-glucopyrcnosidq;crbutosidq 497-76-7  Human plasminogen / plasmin (PL/Fbn) ELISA Kit 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒

4-羥基shēng huà shì jì容量：0.25毫升  HumanExactablenucleraigen,ENAELISAKit 人可提取核抗原(ENA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
酵母浸出膏25克RT  Rabbitcatecholamine,CAELISA試劑盒兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

12135-76-1硫化銨Ammonium sulfide  Humanai-hepatitisBviruscoreIgM,HBc-IgMaibodyELISA試劑盒人核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

偶氮錄膦Ⅳ1克  HumanCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit人牛小腸堿性酶(CIAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(氧基)苯 (Trifluoromethoxy)benzene,99% 456-55-3 5G 通用試劑  人P53(P53)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Difco Mclt cgcr  兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)免疫試劑盒 Rabbit Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit
HCT-15/Taxol特價靛基質(zhì)試驗培養(yǎng)基10克RT  Humanandrogeeceptor,ARELISAKit人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TtypanBlue 10g Sigma分裝  人抗鼠抗體(HAMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

谷酰胺、谷酸測試盒shēng huà shì jì容量：50塊/箱  小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫試劑盒 Mouse soluble Cluster of differeiation 86,sCD86 ELISA Kit

4-拂本言醋鹽 4-Fluorophqnylhydrczinq xy7nochloridq 83-82-8  粘蛋白2(MUC2)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC2 ELISA Kit

福林酚shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫克  Humanα1-Aiypsin,α1-ATELISA試劑盒人α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。