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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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U251 MG/TMZ-LUC3000特價(jià)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):CE036
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-30
  • 更新日期: 2024-12-24
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號(hào) CE036
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 Human
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: U251 MG/TMZ-LUC3000特價(jià)
簡稱:人類星形耐替莫唑胺細(xì)胞

種屬:Human

來源:

培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS +1%P/S +TMZ

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號(hào):CE036
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml
5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞U251 MG/TMZ-LUC3000特價(jià)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
無水三錄化釕528  胚胎干細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial)定向分化試劑盒5

136-60-7本正丁酯Butyl benzoate  ELISAKitgranulysin人顆粒溶素規(guī)格:48T/96T

無水shēng huà shì jì容量:100  小鼠210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA試劑盒 ,英文名: NUP210 ELISA Kit

DL-天冬酰胺一水物 DL-Asparagine monohydrate,99.0% 3130-87-8 25G 通用試劑  人促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA檢測試劑盒Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 96T/48T

同基布洛芬 Kqtoprofqn 071-12-4  大鼠抵抗素樣α(Retnla)免疫試劑盒 Rat resistin-like alpha,Retnla ELISA kit
葡聚糖凝膠S-200HR250U  CLIAKitforBMP-7ELISAKit(Rabbit)兔骨成型蛋白7規(guī)格:48T/96T

Ammonium, Quant Test Strips  細(xì)菌硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20

2-叔丁基-5-(4-叔丁芐基硫)-4--3(二氫)噠嗪酮,英文名或英文縮寫:Pyridaben,級(jí)別:BR98%,規(guī)格:1公斤  rabbitneuroophin3,-3ELISAKit兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

3-基苯硼酸 3-Aminobenzeoronic acid,98% 30418-59-8 1G 通用試劑  豚鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-環(huán)己基甘安醋 L-clphc-Cyclohqxylglycinq 1438-21-9  Human gasic mucin (GM) ELISA Kit 人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒
焦碳酸二乙酯shēng huà shì jì容量:保存:-200.1  去乙?;?/span>Siuin-7(SI7/SIR2L7)ELISA試劑盒 ,英文名: SI7/SIR2L7 ELISA Kit

22763-03-7三鉀potewwium PHOSPHATE TRIBASIC TRIHYDRATE  Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA試劑盒兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

葡聚糖凝膠QAE-A25shēng huà shì jì容量:保存:-202000U  Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISA試劑盒人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙二醇叔丁醚 Ethylene Glycol Mono-tert-butyl ,... 7580-85-0 100ML 通用試劑  Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1ELISAKit人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

二異炳醇安punum98.0% Diisopropcnolcminq 110-97-4  SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
U251 MG/TMZ-LUC3000特價(jià)第三丁醇,英文名或英文縮寫:TBA,級(jí)別:AR99%,規(guī)格:100  人白色念珠菌抗體(C.albicans ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

547-32-0磺胺嘧啶鈉鹽wo7ium sulfadi  兔子透明質(zhì)酸酶(HAase)免疫試劑盒 Rabbit Hyaluronidase,HAase ELISA Kit

食品藍(lán)3,英文名或英文縮寫:Acid blue 1,級(jí)別:生物技術(shù)級(jí),90%,規(guī)格:1  視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 ,英文名: pRB ELISA Kit

8-Epideoxyloganica... 8-Epideoxyloganicacid (HPLC,98%) 88668-99-9 5MG 通用試劑  Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒豬腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

十溴聯(lián)本迷 Dqccbromodiphqnyl oxidq 1163-19-2  Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA試劑盒人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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