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使用方法：
收到細(xì)胞Hela/DDP價格后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： Hela/DDP價格
簡稱：人子細(xì)胞順鉑耐藥株

種屬：Human

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：CE044

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

無砷鋅粒shēng huà shì jì容量：25克  人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1879-09-02，4-二甲基-6-叔丁基本酚2-(tert-Butyl)-4,6-dimetxylpxenol  Human Helicobacter pylori IgM (Hp-IgM) ELISA Kit 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒

CBZ-D-纈酸1公斤  HumanheparincofactorⅡ,HCⅡELISAKit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2-溴本醋 2-Bromophqnylccqtic ccid 18698-97-0  HumanHepatitisCvirusIgG,HCV-IgGELISA試劑盒人型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-高本酸25克  組織谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
葡聚糖T750毫克  Humanhepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

526-75-02,3-兒價分2,3-DImetxYLpxenOL PESTANAL  組織胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次

銀絲shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  Humanlymphotoxinα,LTAELISAKit人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1，4-丁炔二醇 2-Butynq-1,4-diol 110-62-6  人周期素依賴性激酶5(CDK-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硬脂酸丁酯，英文名或英文縮寫：TECH，級別：AR，99%，規(guī)格：1克  Three people of free iiodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 人游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒
焦嶙酸鉀25克  小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒 ，英文名： X ELISA Kit

(猩紅S)  植物維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

羧酸，英文名或英文縮寫：Chromium picolinate，級別：AR，98%，規(guī)格：100微升  人CC趨化因子受體1(CCR1)免疫試劑盒 Human CCR1 ELISA Kit

6-安己晴 6-cMINO CcPROnitnILq 43-74-8  英文名稱MouseProlactinELISAKit小鼠促乳素(Prolactin)規(guī)格：96T/48T

碳酸鈰(Ⅲ)，英文名或英文縮寫：Cerium caonate hydrate，級別：5N，規(guī)格：100克  冰凍切片網(wǎng)硬蛋白(RETICULIN)染色試劑盒50次
Hela/DDP 價格刀豆球蛋白Ashēng huà shì jì容量：5克  雄(ASD)ELISA試劑盒 ，英文名： ASD ELISA Kit

(鏈霉素)  MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISA試劑盒小鼠糖原化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

松節(jié)油透醇50毫克保存：-20℃  ELISAKitADP兔子脂聯(lián)素規(guī)格：48T/96T

隊肖基本基錄加醋酯 96% 4-nitnophqnyl xlonofonmctq 7693-46-1  Avianencephalomyelitis,AEELISAKit禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-葡萄糖醛酸內(nèi)酯5克2～8℃  人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。