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基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：人奧沙利鉑耐藥細(xì)胞

種屬：Human

來(lái)源：上皮樣

培養(yǎng)基：RIPM1640+10%FBS+10ug/ml藥

狀態(tài)：1:3 to 1:8

產(chǎn)品規(guī)格：貼壁

單位：

貨號(hào)：CE057

使用方法：
收到細(xì)胞HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：RT，避光200毫升  聚糖對(duì)甲酰胺(2-AB)熒光標(biāo)記試劑盒20次

PH緩沖液　PH6.0(20℃)NA  ELISAKitHSP-70人熱休克蛋白70規(guī)格：48T/96T

L-天冬酸100克  小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

基二茂鐵 Ferrocenylamine,96% 1273-82-1 100MG 通用試劑  Rat mammary carcinoma marker-ca153 -CA153ELISA 大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒

輕化 litxium hydridq 7280-67-8  Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
偏銻酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium antimonate，級(jí)別：CP，98.5%，規(guī)格：100毫升  嗜酸性相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒 ，英文名： EAR2 ELISA Kit

5968-90-1黃苷XANTHOSINE DIHYDRATE  PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISA試劑盒豬生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

麗春紅BS，英文名或英文縮寫(xiě)：Acid red 66，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：100克  Heneggphosvitinphosphopeptides,PPPELISA試劑盒雞蛋卵黃高1蛋酸肽(PPP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-苯基- 3-Phenyl-2-propen-1-ol (HPLC,≥98%) 4407-36-7 5MG 通用試劑  Humanai-IgAaibodyELISAKit人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去輕抗壞血醋 Dqxy7nocSCORBIC cCID 490-83-2  人白細(xì)胞分化抗原40配體(CD40) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿式乙酸鋁shēng huà shì jì容量：100克  人S100蛋白(S-100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

10526-80-4烯醇酸單環(huán)己銨鹽(+4℃)Phosphoenolpyruvic acid cyclohexylammonium salt  兔子6-酮素F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒 Rabbit 6-keto-PGF1α ELISA Kit

葡聚糖T20shēng huà shì jì容量：保存：-20℃200u  去乙?；?/span>Siuin-5(SI5/SIR2L5)ELISA試劑盒 ，英文名： SI5/SIR2L5 ELISA Kit

異丁香酚 Methyl isoeugenol,≥98% 93-16-3 25ML 通用試劑  RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰本二加醋二異壬酯 Diisononyl phthclctq 8223-1-0  Humanai-filaggrinaibody,AFAELISA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應(yīng)膽堿脂酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：RT50支/包  豬L-乳酸脫氫酶(L-LDH)免疫試劑盒 Pig L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit

108-65-6丙二醇乙酸酯1-metxoxy-2-propyl acetate  禽病毒(ALV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

十六烷500毫克2～8℃  Humanpaxillin,PaxELISA試劑盒人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十八烷基基化銨 Trimethyloctadecylammonium chloride,≥... 112-03-8 1G 通用試劑  ELISAKitA豬抗凝血酶受體規(guī)格：48T/96T

異麥芽三糖 ISOMcLTOTRIOSq 3371-20-4  HumandysophinELISAKit人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T