產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4233 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒直銷 | Prevotella spp.PCR | BKP4233 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
3,6'-Disinapoylsucrose 139891-98-8 中文名:3,6'- 二芥子?;崽?/span> 分子式:C34H42O19 度:98.0% 關(guān)鍵詞: ; 遠(yuǎn)志; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠甲狀腺球蛋白elisa試劑盒 小鼠甲狀腺球蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠甲狀腺球蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠甲狀腺球蛋白試劑盒、小鼠甲狀腺球蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
3,6-Bis(hydroxymethyl)durene 7522-62-5 中文名:3,6-雙(羥甲基)杜烯 分子式:C12H18O2 度:98.0% 小鼠甲狀腺過氧化物酶elisa試劑盒 小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒、小鼠甲狀腺過氧化物酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 2450-53-5 中文名:異綠原酸A 分子式:C25H24O12 度:98.0% 關(guān)鍵詞: *; 抗毒; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 24352-51-0 中文名: 分子式:C28H42 度:% 關(guān)鍵詞: 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3',5'-Anhydrothymidine 7481-90-5 中文名:3',5'-脫水胸苷 分子式:C10H12N2O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠舒緩激肽(BK)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人 Apelin(Apelin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ampicillin Trihydrate 中文名:氨芐西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 度:98.0%
熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-Hydroxycatalponol 中文名: 分子式:C15H18O3 度:97.0%
熱休克蛋白70 英文名稱: Heat shock protein 70 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HSP70 Palmitone 502-73-8 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
熱休克蛋白27 英文名稱: Heat shock protein 27 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HSP27 Palmitone 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O
熱休克蛋白 70(HSP70) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Panaxydiol 63910-76-9 中文名: 分子式:C17H24O2 度:% 關(guān)鍵詞:
普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒直銷SV40T轉(zhuǎn)化人臍內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1果膠(半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %)質(zhì)量規(guī)格:半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %Pectin
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(AR,99%)質(zhì)量規(guī)格:AR,99%Tributyl phosphate
CL-0184PANC-1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(CP)質(zhì)量規(guī)格:CPTributyl phosphate
TNK2 Others Human 人 ACK1 / TNK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Tributyl phosphate
人上皮細(xì)胞裂解物HMEpiCL3,5-二水楊酸鋰(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCLithium 3,5-diiodosalicylate
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-芐氧羰基-D-色酸,英文名或英文縮寫:CBZ-D-Trp,級別:特,98%,規(guī)格:10克
人神經(jīng)元RNAHN miRNA5 μg均本四加臘酐 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic cnhydridq 1989/3/7
FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 米力農(nóng)相關(guān)物質(zhì)A Milrinonq Rqlctqd CoMpound c;1,6-Dixy7no-2-Mqthyl-6-oxo(3,4'-bipyridinq)-5-ccrboxcMidq 80047-4-1
人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL四乙酸二基二鈉鹽,英文名或英文縮寫:EDTA-2Na,級別:BR,99%,規(guī)格:1克
3T3NIH細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 HUVEC(人臍內(nèi)皮細(xì)胞) 小鼠細(xì)胞;GT1-1GDX 502(聚二本多孔小球)NA