產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4235 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
丙酸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Propionibacterium spp.PCR | BKP4235 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene 36157-40-1 中文名: 分子式:C6H4Cl2OS 人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 154127-42-1 中文名: 分子式:C10H16N2O6S3 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Boc-3-Phenylisoserine 145514-62-1 中文名: 分子式:C14H19NO5 人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid 196404-55-4 中文名: 分子式:C22H25NO6 人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N-Benzoyl-(2R,3S)-3-phenylisoserine 132201-33-3 中文名: 分子式:C16H15NO4 人脂蛋白aelisa試劑盒 人脂蛋白a試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂蛋白a試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂蛋白a試劑盒、人脂蛋白a elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人Apelin36elisa試劑盒 人Apelin 36試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人Apelin 36試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人Apelin 36試劑盒、人Apelin 36 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide 302964-24-5 中文名: 分子式:C11H10ClN3OS
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Benzothiazolol 中文名:2-羥基苯并噻唑 分子式:C7H5NOS 度:98.0%
人17-類固醇(17-KS)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Benzylacrylic acid 中文名: 分子式:C10H10O2
人12羥二十烷四烯酸elisa試劑盒 人12羥二十烷四烯酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人12羥二十烷四烯酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人12羥二十烷四烯酸試劑盒、人12羥二十烷四烯酸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Triethyl 77-93-0 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7
人1,3-二0酸甘油酸elisa試劑盒 人1,3-二0酸甘油酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人1,3-二0酸甘油酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人1,3-二0酸甘油酸試劑盒、人1,3-二0酸甘油酸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Tryptophan 153-94-6 中文名: 分子式:C11H12N2O2
丙酸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T達(dá)格列凈一水 ;達(dá)格列嗪水合物質(zhì)量規(guī)格:>99%Dapagliflozin propanediol hydrate
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 安塞曲匹/膽脂轉(zhuǎn)移蛋白阻滯劑質(zhì)量規(guī)格:>98%Anacetrapib;MK0859
CL-0144LoVo(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2達(dá)比加群酯質(zhì)量規(guī)格:>97%Dabigatran etexilate
GPT2 Others Rat 大鼠 GPT2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利伐沙班質(zhì)量規(guī)格:度≥98%Rivaroxaban
人腎系膜細(xì)胞裂解物HRMCL16-DOXYL-硬脂酸自由基(>95.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)16-DOXYL-stearic Acid Free Radical
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D(+)GALACTOSED-半乳糖*白色結(jié)晶粉末RTsigma
人上皮細(xì)胞總RNAHMEpiC NA茜素黃GG Alizarin yellow GG 584-42-9 25G 通用試劑
CTSL1 Others Mouse 小鼠 CTSL / Cathepsin-L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 馬尿醋;本酰安基醋;本酰甘安醋 Hippuric ccid;Bqnzoyl-cMino ccqtic ccid;N-Bqnzoylglycinq;Bqnzoylglycocoll 492-69-
HCT-15 人細(xì)胞MaltosemonohydrateD-(+)-麥芽糖單水合物0.1UN超,99%
CL-0401NCI-H446(人小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×214936-97-1藍(lán)I鈉鹽XYLIDYL BLUE I wo7ium SALT
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:丙酸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。