產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4271 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
真鯛虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)(PCR | BKP4271 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:真鯛虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 中文名: 分子式:C28H46O2 度:% 兔心肌鈣蛋白I(rabbit cTnI) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
7-Oxo-β-sitosterol 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 度:98.0% 兔心肌鈣蛋白T(rabbit c) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Schleicheol 2 中文名: 分子式:C30H52O2 度:% 兔胱抑素C(rabbit Cystatin C) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Ikshusterol 3-O-glucoside 中文名: 分子式:C35H60O7 度:% 兔交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Cerevisterol 中文名:啤酒甾醇 分子式:C28H46O3 度:96.5% 兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human HNP1-3 (Neuophil Peptide 1-3) ELISA Kit 2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline 146578-99-6 中文名: 分子式:C31H25FNOP 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide 24522-30-3 中文名: 分子式:C10H7F3N2O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒、人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C31H25FNOP
人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone 18465-71-9 中文名: 分子式:C5H8O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 臭常山; 絳三葉; 深紅三葉草; 菜豆; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人中心體蛋白110(CEP110)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit 2-Aminoisonicotinic acid 13362-28-2 中文名:2-氨基異煙酸 分子式:C6H6N2O2
真鯛虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細(xì)胞)梓醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Catalpol
CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2紫草素,左旋紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Shikonin
RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紫草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Lithospermic acid
人內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HLECL紫丁香酚苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Syringin
A2780/Taxol細(xì)胞,人紫杉醇耐藥株 鼠腹水單核細(xì)胞瘤,J774A.1細(xì)胞 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml竹節(jié)參皂苷IVa(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供含量測(cè)定用chikusetsu saponin Iva
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 酰輔酶A 內(nèi)鹽 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-
MDA-MB-436 人腺癌細(xì)胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分離試劑
NCI-H358人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸鈉*白色至微黃色精細(xì)結(jié)晶RTsigma
KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標(biāo)簽)(甘油)
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。