產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4282 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
小孢子酒曲菌PCR檢測試劑盒說明書 | Rhizopus microspousPCR | BKP4282 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:小孢子酒曲菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester 中文名:4,5-二咖啡??鼘幩峒柞?/span> 分子式:C26H26O12 度:97.5% 兔子抗中性粒細胞顆??贵w(ANGA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Methyl chlorogenate 中文名:綠原酸甲酯 分子式:C17H20O9 度:98.0% 兔子孕激素/孕(PROG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子?;崽?/span> 分子式:C34H42O19 度:98.0% 兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Triethyl 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 度:98.0% 大鼠巨噬細胞蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
α-Lipoic acid 中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 度:98.5% 兔子巨噬細胞炎性蛋白1αelisa試劑盒 兔子巨噬細胞炎性蛋白1α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子巨噬細胞炎性蛋白1α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子巨噬細胞炎性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細胞炎性蛋白1α elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人轉(zhuǎn)鐵蛋白(F)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile 143612-79-7 中文名: 分子式:C13H13ClN2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile 143612-79-7 中文名: 分子式:C13H13ClN2
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one 85175-59-3 中文名: 分子式:C15H18ClNO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人轉(zhuǎn)錄因子 英文名稱: Human Engrailed-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EN-2 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名: 分子式:C11H13N3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human ATF6 (Activating anscription Factor 6) ELISA Kit 2''-O-Acetylsprengerinin C 1220707-33-4 中文名: 分子式:C46H72O17
小孢子酒曲菌PCR檢測試劑盒說明書rCF, 大鼠成纖維細胞 A4細胞 HL-7702(肝細胞)醋酸舍莫瑞林 Sermorelin Acetate質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%
人結(jié)直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]磺胺嘧啶銀Silver Sulfadiazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31,BR
EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺嘧啶銀(標(biāo)準(zhǔn)品)Silver Sulfadiazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人結(jié)細胞;T84辛伐他汀 Simvastatin質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細胞培養(yǎng)級
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀,辛伐他?。?biāo)準(zhǔn)品)Simvastatin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人細胞裂解液 (陽性對照) 人參皂甙Rb3,英文名或英文縮寫:Ginsenoside Rb3,級別:BR,規(guī)格:25克
人胚肺二倍體細胞;HEL-26-溴-1-己1 6-Bromo-1-hqxqnq 692-47-8
大鼠細胞;IR983F 腺癌細胞,Caco-2細胞 WEHI 164細胞,鼠纖維細胞系乙二茶堿,英文名或英文縮寫:Aminophylline hydrate,級別:AR,規(guī)格:25克
GBC-SD, 人細胞 Human氫氧化shēng huà shì jì容量:25克
CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細胞裂解液 (陽性對照) (2-羥基磺酸))