產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4239 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
變形桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Proteus spp.PCR | BKP4239 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:變形桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
3-Amino-3-phenyl-1-propanol 14593-04-5 中文名:3-氨基-3-苯基-1-丙醇 分子式:C9H13NO FDA水解酶試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
DL-2-Amino-n-octanoic acid 644-90-6 中文名:DL-2-氨基正辛酸 分子式:C8H17NO2 土壤酸性蛋白酶試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
Amoxapine 14028-44-5 中文名:阿莫沙平 分子式:C17H16ClN3O 土壤漆酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
6-Aminoquinoxaline 6298-37-9 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 突觸核蛋白 英文名稱: Human α Synucleinα 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): α-SYN
6-Aminonicotinic acid 3167-49-5 中文名:6-氨基煙酸 分子式:C6H6N2O2 血清鐵蛋白 英文名稱: ferritin in serum 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): SF
人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit ELISA. 96T/48T Timosaponin B-II 136656-07-0 中文名:知母皂苷B-II 分子式:C45H76O19
人補(bǔ)體因子4(C4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human C4 (Compleme Compone 4) ELISA Kit 3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子?;崽?/span> 分子式:C34H42O19 度:98.0%
人表皮轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGM3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human TGM3 (ansglaminase 3, Epidermal) ELISA Kit 3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan 915095-94-2 中文名: 分子式:C17H16ClIO2
人白介素27(IL-27)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human IL-27 (Ierleukin 27) ELISA Kit 3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 中文名: 分子式:C21H16FNO 度:98.0%
人α2巨球蛋白elisa試劑盒 人α2巨球蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人α2巨球蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人α2巨球蛋白試劑盒、人α2巨球蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 中文名: 分子式:C5H9N3O
變形桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)SP2/0, 小鼠細(xì)胞亞甲藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Methylthioninium Chloride Trihydrate
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 小鼠精母細(xì)胞,GC-2spd細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細(xì)胞)華法林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測(cè)定用Warfarin
人類原巨核細(xì)胞型細(xì)胞;UT-7華法林鈉質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRWarfarin
CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 洛莫司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測(cè)定Lomustine
小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA度洛西汀質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Duloxetine
TDGF1 Protein Human 重組人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)偏重亞鉀500克RT
人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL三基錄硅烷 Chlorotriqthylsilcnq 994-30-9
人癌細(xì)胞;MDA-MB-157異胍 (常規(guī)) Guanidine thiocyanate (≥97.0%) 593-84-0 25G 通用試劑
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) PEA瓊脂10張/盒
CM-H134人角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL(二甲亞砜)