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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4246 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
普羅威登斯菌通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | Providencia spp.PCR | BKP4246 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：普羅威登斯菌通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
3-Aminoadamantan-1-ol 中文名： 分子式：C10H17NO 素 E1(PGE1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
3-Amino-5-phenylpyrazole 中文名：3-氨基-5-苯基吡唑 分子式：C9H9N3 血小板生成素 英文名稱： Thromboietin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TPO
3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑 分子式：C2H4N4S 總蛋白S 英文名稱： total protein S 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TPS
3-Amino-4-methylbenzamide 中文名：3-氨基-4-甲基苯甲酰胺 分子式：C8H10N2O 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 英文名稱： tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： AIL/APO 2L
3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 中文名：3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式：C7H7NO3 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1 英文名稱： tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： AIL R1
人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit ELISA. 96T/48T Capecitabine 中文名：卡培他濱 分子式：C15H22FN3O6
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigecycline 中文名： 分子式：C29H39N5O8
人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigogenin 77-60-1 中文名：劍麻皂素 分子式：C27H44O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 毛地黃屬; 萬(wàn)年蘭屬; 螺甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigogenin 77-60-1 中文名：劍麻皂素 分子式：C27H44O3
人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigogenin 中文名：劍麻皂素 分子式：C27H44O3
普羅威登斯菌通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞，人細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,HBE細(xì)胞 腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)CLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)CLA
兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCFBFMCLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)MCLA
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) FCLA 自由酸[化學(xué)發(fā)光試劑]質(zhì)量規(guī)格：化學(xué)發(fā)光試劑FCLA Free Acid
CL-0143Lncap clone FGC(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2紅-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)質(zhì)量規(guī)格：含氮量：9.00-10.30 %Red-CLA
CTSZ Others Human 人 CTSZ 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 13X分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱專用)質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱專用Molecular sieves Type 13X
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞6-氮雜尿嘧啶shēng huà shì jì容量：RT，避光25克
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL茜素 Alizarin,97% 72-48-0 5G 通用試劑
人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg二言醋組安 Histcminq dixy7nochloridq 1926/9/8
PCNA Others Human 人 PCNA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) LOADINGDYEBASE,25X25X 蛋白電泳上樣染料超級(jí)暗紫色微粘稠液體RTsigma
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO444-94-8兒價(jià)級(jí)兒流(劇毒)7m7w
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
