產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4283 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
馬紅球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Rhodococcus equiPCR | BKP4283 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:馬紅球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine 145783-14-8 中文名: 分子式:C7H7Cl2N3O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine 145783-15-9 中文名: 分子式:C7H9Cl2N3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester 188742-80-5 中文名:4,5-二咖啡??鼘幩峒柞?/span> 分子式:C26H26O12 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 抗氧化; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane 35202-54-1 中文名: 分子式:C11H11NO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α 英文名稱: Macrophage Inflammatory protein 1α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MIP-1α/CCL3
4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine 28783-41-7 中文名: 分子式:C7H10ClNS 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠N-甲基-D-天門冬酸受體亞單位1型 英文名稱: Mouse N-methyl-D-aspaate receptor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NMDA-R1
人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol 中文名: 分子式:C6H12O2 度:%
人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-(Boc-Amino)piperidine 309956-78-3 中文名: 分子式:C10H20N2O2 度:98.0%
人轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol 中文名: 分子式:C6H12O2
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體elisa試劑盒 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒、人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone 中文名: 分子式:C6H10O2
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit 3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate 239463-85-5 中文名: 分子式:C26H31N3O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
馬紅球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)RCC-krause細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,CaSKi細(xì)胞 人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNAHHIRSC NA幼枝含斷氧化馬錢子甙(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Secoxyloganin
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-醋酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 Acetate
FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 葡萄糖酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 gluconate
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3鹽酸索他洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Sotalol hydrochloride
ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 地奈德標(biāo)記13C3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Desonide - Labeled 13C3
PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / appin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 固鹽shēng huà shì jì容量:2~8°C50毫克
人T細(xì)胞細(xì)胞;HuT 78姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP
人卵巢成纖維細(xì)胞(HOF) ( 5×105 )苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用試劑
CM-R048大鼠腸巨噬細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL二炎酸鹽shēng huà shì jì容量:100克
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16 小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLD-Fructose 250g/500g/1kg/5kg原裝 Amresco 0226
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。