產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4314 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書 | Salmonella kentuckyPCR | BKP4314 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
4β-Hydroxywithanolide E 中文名:4β-羥基醉茄內酯E 分子式:C28H38O8 植物二(MDA)測定試劑盒(比色法)
4-Oxododecanedioic acid 中文名: 分子式:C12H20O5 維生素E(VitaminE)測定試劑盒(比色法)
4-O-(3-nitropropanoyl)corollin 中文名: 分子式:C18H24N4O18 超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒
4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H8N2O4 氧化酶(XOD)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid 中文名: 分子式:C12H14N2O2 葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
桿菌(YP)核酸檢測試劑盒 48T 3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 156767-69-0 中文名: 分子式:C28H46O2
噬中性及細胞活化肽 -2(NAP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Testosterone isocaproate 中文名:異己酸睪酮 分子式:C25H38O3
噬酸性粒細胞趨化因子 -2(Eotaxin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 3090-70-8 中文名:3-乙?;?/span>-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3 度:98.0%
嗜酸性粒細胞陽離子蛋白 英文名稱: eosinophil cationic protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ECP 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名: 分子式:C28H44O3 度:97.0% 關鍵詞: 靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標準品; 微生物代謝產物; 天然產物; 天然產物庫
嗜酸性粒細胞趨化因子 (Eotaxin) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Biosource 3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 88191-14-4 中文名: 分子式:C28H44O4 度:97.0% 關鍵詞: 靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標準品; 微生物代謝產物; 天然產物; 天然產物庫
肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸柔紅霉素(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Daunorubicin HCl
人少突膠質細胞HO鹽酸柔紅霉素(進口)質量規(guī)格:USP,進分sigmaD8809 Daunorubicin HCl
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人細胞,A-704細胞 AGS(胃腺癌細胞)達格列嗪;達格列凈質量規(guī)格:>97%,BR,生化試劑級Dapagliflozin
人神經母細胞瘤細胞;SH-SY5Y甘草查而酮 A(標準品)質量規(guī)格:含量≥98.0%,標準品Licochalcone A
FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細胞裂解液 (陽性對照) 三氯卡班質量規(guī)格:>98.0%Triclocarban
人神經星形膠質細胞完全培養(yǎng)基 100mLSBES;2-溴乙基磺酸鈉質量規(guī)格:>98.5% 2-bromoethanesulphonate
JB6-C41細胞,小鼠皮膚細胞 SHG44(細胞) 犬腎細胞系/野生型;MDCK/wildBICINE;N,N-二羥乙基甘氨酸質量規(guī)格:>99%BICINE
EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽)BES salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉質量規(guī)格:>99%BES Salt
LS 180(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1mlBES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸質量規(guī)格:>99%BES free acid
人上皮細胞HBEpiCBz-2'-脫氧胞苷亞1酰胺單體質量規(guī)格:>98%Bz-dC Phosphoramidite
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。