產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4365 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒直銷 | Sinorhizobium spp.PCR | BKP4365 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
6-Hydroxyrubiadin 中文名:6-羥基甲基異茜草素 分子式:C15H10O5 Acetaldehydeoxime
6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole 中文名: 分子式:C12H14ClFN2O 乙酰胺 100g
6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone 中文名: 分子式:C14H24O8 Acetamide
6-Chloroguanine riboside 中文名:6-氯鳥嘌呤核苷 分子式:C10H12ClN5O4 乙脫氫酶(ALDH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
6-Benzyloxypurine 中文名:6-芐氧基嘌呤 分子式:C12H10N4O 輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Aminoindole 5192-03-0 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Aminoindole 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0%
兔去甲上腺素elisa試劑盒 兔去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Aminoindazole 19335-11-6 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0%
兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Aminoindazole 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3
兔去甲上腺素(NA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone 中文名:4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮 分子式:C17H14N2O2 度:98.0%
中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒直銷NCI-H1299(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-去甲基羅格列酮-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl Rosiglitazone-d4
原代心肌細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml羅格列酮(鉀鹽)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Rosiglitazone (potassium salt)
EDAR Others Rat 大鼠 EDAR 人細胞裂解液 (陽性對照) 羅格列酮鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口rosiglitazone hydrochloride
大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基 100mL5-羥基羅格列酮質(zhì)量規(guī)格:美國進口5-Hydroxy Rosiglitazone
HaCaT人永生化表皮細胞 HaCaT immortalized human epidermal cells DMEM+10% FBS去甲異波爾定(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Norisoboldine
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) GENEPAGE6%EZSQUEEZE*CLDPAK*6% GENE-PAGE, 擠壓式瓶裝生物技術(shù)級10X75MLCOLD
HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞氧基三本基錄化鏻 (Mqthoxymqthyl)triphqnylphosphonium chloridq 4009-98-7
RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 [X464-20C]細胞 Vero(非洲綠猴腎細胞)左卡泥汀相關(guān)物質(zhì)A Lqvoccrnitinq Rqlctqd CoMpound c;3-ccrboxy-N,N,N-triMqthyl-2-propqn-1-cMiniuM chloridq 6238/8/2
人十二脂腸腺癌;HuTu-80抑肽酶(牛肺)shēng huà shì jì容量:RT25克
CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照) N-芴甲氧羰酰基-L-亮酸NA
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。