產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4366 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒說明書 | Spirocheta anserinaPCR | BKP4366 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
6-O-Feruloylglucose 中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖 分子式:C16H20O9 度:97.5% 兔子甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Arillatose B 中文名: 分子式:C22H30O14 度:96.5% 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Catalponol methylthiomethyl ether 中文名: 分子式:C17H22O2S 度:97.5% 兔子球蛋白M(IgM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Ethyl glucoside 中文名:乙基葡萄糖苷 分子式:C8H16O6 度:97.0% 兔子甲狀腺素(T4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Hydroxycatalponol 中文名: 分子式:C15H18O3 度:97.0% 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔熱休克蛋白70elisa試劑盒 兔熱休克蛋白70試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔熱休克蛋白70試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白70試劑盒、兔熱休克蛋白70elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Azacytidine 中文名:5-氮胞苷 分子式:C8H12N4O5 度:98.0%
兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Aminosalicylic acid 89-57-6 中文名:5-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔熱休克蛋白40elisa試劑盒 兔熱休克蛋白40試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔熱休克蛋白40試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白40試劑盒、兔熱休克蛋白40 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Azacytidine 中文名:5-氮胞苷 分子式:C8H12N4O5
兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Aminoindole 5192-03-0 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0%
兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Aminosalicylic acid 89-57-6 中文名:5-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3
鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒說明書NBL1 Others Human 人 DAN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6,8-二甲氧基莫西沙星鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口6,8-Dimethoxy Moxifloxacin Hydrochloride
色標(biāo)法檢測試劑盒NO8-乙氧基莫西沙星質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口8-Ethoxy Moxifloxacin
BCAM Others Rat 大鼠 BCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 8-去甲氧基-8-氟莫西沙星質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口8-Desmethoxy-8-fluoro Moxifloxacin
人角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL外消旋順式-莫西沙星?;?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口rac cis-Moxifloxacin Acyl-β-D-glucuronide
CT-26.WT細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 CBRH-7919(大鼠細(xì)胞) 大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2美拉諾坦Ⅱ醋酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Melanotan II acetate salt
LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 柳酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium Salicylate,級別:CP,規(guī)格:500克
EC9706 庖肉培養(yǎng)基 Cookqd Mqct Mqdium B
SW620人細(xì)胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBSFASTBLACKpotewwiumSALT快 K鹽*褐色粉末RTsigma
TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)冰堿,英文名或英文縮寫:wo7ium caonate decahydrate,級別:GR,99.8%,規(guī)格:250毫克
人胚胎絨毛細(xì)胞(HAF)(1×106 ) 細(xì)胞名稱 種屬Amidoblack10B 5g/10g/25g/100g原裝 Sigma N3393
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。