產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4370 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
圣路易斯病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | St.Louis Encephalitis Virus(SLEV)RTPCR | BKP4370 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:圣路易斯病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one 中文名: 分子式:C12H13NO3 度:98.0% 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(1S)-4,5-Dimethoxy-1-[(methylamino)methyl]benzocyclobutane 中文名: 分子式:C12H18ClNO2 度:98.0% 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane 中文名: 分子式:C11H11NO2 度:98.0% 小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Ivabradine 中文名:鹽酸伊伐布雷定 分子式:C27H37ClN2O5 度:98.0% 小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile 中文名: 分子式:C15H19N3O5 度:98.0% 小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔損傷分子-1(rabbit Kim-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7
兔素(Renin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyl D-glutamate 2578-33-8 中文名:D-谷氨酸5-苯甲酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0%
兔素(Renin)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Benzoylpentanoic acid 4144-62-1 中文名:5-苯甲酰基戊酸 分子式:C12H14O3 度:98.0%
兔素(rabbit Renin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Aminosalicylic acid 中文名:4-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
兔瘦素(rabbit Leptin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Hydroxymethylfurfural 中文名:5-羥甲基糠醛 分子式:C6H6O3 度:%
圣路易斯病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書MS751(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2化木蘭花堿質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Magnoflorine iodide
BEL-7402(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R123大鼠角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人細(xì)胞;Hela去甲烏藥堿鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Higenamine hydrochloride
CM-H016人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL避蚊胺(99%)質(zhì)量規(guī)格:0.99DEET
IL12B Others Rat 大鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 特丁通(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Terbumeton
原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml噻呋酰胺(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%Thifluzamide
Promocell C-22120 Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV套裝 500ml辛伐他汀羥基酸銨鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Simvastatin Hydroxy Acid, Ammonium Salt
人真皮成纖維細(xì)胞-總RNAHDF-a NAN-氧基索拉菲尼質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Sorafenib N-Oxide
小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-c)(5×105)甲基索拉菲尼-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Sorafenib-methyl-d3
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL硫康唑質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Sulconazole
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFP 小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL6-羥基質(zhì)量規(guī)格:>98%(GC);進(jìn)分6-Hydroxycoumarin