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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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解沒(méi)食子酸鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP4394
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2024-12-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP4394
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

解沒(méi)食子酸鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

Streptococcus gallolyticusPCR

BKP4394

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:解沒(méi)食子酸鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

9-Anthracenecarboxylic acid  中文名:9-蒽甲酸  分子式:C15H10O2    磺酸 SHES   25g

9-Aminominocycline   中文名:  分子式:C23H29ClN4O7    Isicacidsalt   100g              

9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  中文名:9,9-[4-(2-羥乙氧基)苯基]  分子式:C29H26O4    乙型   英文名稱:   Influenza B HA   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   HA

9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  中文名:9,9-(4-羥苯基)  分子式:C25H18O2    甲型H3N2HA1   英文名稱:   Influenza A H3N2 HA1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   H3N2 HA1

9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名:9,9-(4-氨基-3-甲苯基)  分子式:C27H24N2    生長(zhǎng)激素   英文名稱:   growth hormone   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   HGH
兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminouracil  873-83-6  中文名:6-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2  度:98.0%   

兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名:6-芐氧基嘌呤  分子式:C12H10N4O 

兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminouracil  873-83-6  中文名:6-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2 

兔子白介素10(IL-10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              6-Benzyloxyindole  中文名:6-芐氧基吲哚  分子式:C15H13NO 

兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminoquinoxaline  中文名:6-氨基喹喔啉  分子式:C8H7N3  度:98.0%
解沒(méi)食子酸鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系阿非迪霉素;艾菲地可寧質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國(guó)進(jìn)口Aphidicolin from Nigrospora oryzae

96-C細(xì)胞,低轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人細(xì)胞,PC-3細(xì)胞 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF NA京尼平質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRGenipin

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7桔梗皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Platycodin D

AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 菊苣酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cichoric Acid

小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076金胺O質(zhì)量規(guī)格:BSAuramine O
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16D-Val-Leu-LysPNAo2HC1D-纈酰-L-亮酰-L-賴酰1BR,98%

GP1BB Others Human GP1Bβ / CD42c 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,34,4-聯(lián)本四羧醋二酐 3,3',4,4'-Biphqnyltqtrcccrboxylic dicnhydridq 40-87-3

人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1DL-Lysinemonoxy7nochlorideDL-氫錄賴酸100BR,99%

CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二甲基硅油,英文名或英文縮寫(xiě):Dimetxylsilicone fluid,級(jí)別:GR,85%,規(guī)格:10

COLO320/DM 人細(xì)胞NiacinassayMedium 100g原裝 BD 232210
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。


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