產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4382 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
路鄧葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Staphylococcus lugdunensisPCR | BKP4382 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:路鄧葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3 度:% 關(guān)鍵詞: ; 麥角甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 1207441-49-3 中文名: 分子式:C29H46O3 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T
7α-Hydroxystigmasterol 64998-19-2 中文名:7α-羥基豆甾醇 分子式:C29H48O2 度:% 關(guān)鍵詞: 狼毒; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
7α-Hydroxysitosterol 34427-61-7 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 甘蔗; 菠蘿; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠可溶性 P- 選擇素 (mouse sP-Selectin/ sCD62P) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) R&D
7-Oxo-β-sitosterol 2034-74-4 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗; 松屬; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β1 (mouse TGF-β1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
兔氧化抗體(OLAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
兔氧化抗體(OLAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名: 分子式:C21H32O3
兔氧化 英文名稱: Rabbit oxidized Low Density Lipoprotein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): oxLDL Pemetrexed 137281-23-3 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C20H21N5O6
兔血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7
兔血小板衍化生長(zhǎng)因子(rabbit PDGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2 度:98.0%
路鄧葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)MDBK (NBL-1)牛腎細(xì)胞 MDBK (NBL-1) of bovine kidney cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS維生素 D3 ((膽骨化醇)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4000萬(wàn)IU/gVitamin D3
IL18 Protein Mouse 重組小鼠 IL18 / IL-18 蛋白帕唑帕尼鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Pazopanib HCl
NCI-H524(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MCF7(癌細(xì)胞)噻托溴銨質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,無(wú)水物Tiotropium bromide anhydrous
CL-0440SK-MEL-1(人皮膚色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氨標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水Ammonia solution
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酰嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Amidosulfuron
MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone
人胚胎胰腺組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HPE-2 人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone
人羊膜細(xì)胞;WISH雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 (HPAF)( 5×105 )二苯砜-3,3'-二磺酸二鈉鹽(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Diphenylsulfone-3,3'-disulfonic Acid Di Salt
CL-0317AML-193(人急性單核細(xì)胞單核細(xì)胞)5×106cells/瓶×25,10-二氫-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N)5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine