產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4503 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
活動錐蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Trypanosoma vivaxPCR | BKP4503 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Bindone 1707-95-5 中文名:雙茚二酮 分子式:C18H10O3 度:98.0% 小鼠腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse BDNF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Bi-linderone 1227375-09-8 中文名: 分子式:C34H32O10 度:96.5% 關(guān)鍵詞: 山胡椒屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子受體(mouse BDNF R) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Bezafibrate 41859-67-0 中文名:苯扎貝特 分子式:C19H20ClNO4 度:98.0% 小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Betaxolol 63659-19-8 中文名:鹽酸倍他洛爾 分子式:C18H30ClNO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Betamipron 3440-28-6 中文名:倍他米隆 分子式:C10H11NO3 度:98.0% 小鼠腦肽 英文名稱: brainnaiureticpep tid 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BNP
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 Atracurium oxalate 64228-78-0 中文名:阿曲庫胺草酸鹽 分子式:C53H68N2O16 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒 可見分光光度法 10管/9樣 Vilazodone 163521-08-2 中文名:鹽酸維拉唑酮 分子式:C26H28ClN5O2
酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Atractylodin 55290-63-6 中文名:蒼術(shù)素 分子式:C13H10O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗菌; ; 蒼術(shù)屬; 聚乙炔; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測試盒 可見分光光度法 10管/9樣 α-Tocopherolquinone 7559/4/8 中文名: 分子式:C29H50O3
酰基輔酶A氧化酶 英文名稱: Mouse Acyl-CoA oxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACO Decoquinate 18507-89-6 中文名:癸氧喹酯 分子式:C24H35NO5
活動錐蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)HPMEC Pellet 人肺微內(nèi)皮細(xì)胞團塊 > 1 mio.cells 多聚賴氨酸 1 mg/mlPLLDL-高苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Homophenylalanine
CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2DL-高絲氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Homoserine
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,MET抑制劑Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl
人角膜細(xì)胞cDNAHK cDNADL-色氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Tryptophan
豬腎細(xì)胞;PK(15) 人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞,NK-92MI細(xì)胞 U27細(xì)胞,KM小鼠子瘤株DL-絲氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)DL-Serine
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy5-氟乳清酸水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口5-Fluoroorotic acid hydrate
人表皮色素細(xì)胞-淺色素(HEM)( 5×105 )5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶質(zhì)量規(guī)格:美國進口5-Fluoro-1,3-dimethyluracil
人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞5-氟尿嘧啶核苷質(zhì)量規(guī)格:美國進口5-Fluorouridine
人胎盤絨膜癌細(xì)胞;BeWo 大鼠膀胱成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5-氟二氫嘧啶-2,4-二酮質(zhì)量規(guī)格:美國進口5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione
N-H 小鼠細(xì)胞1,3,5-三(溴甲基)苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,3,5-Tris(bromomethyl)benzene
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:活動錐蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。