產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4540 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
高首鱘虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | White Sturgeon Iridovirus(WSIV)PCR | BKP4540 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:高首鱘虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Cefixime 中文名:頭孢克肟 分子式:C16H15N5O7S2 度:98.0% 小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(mouse CTGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
1-Actamido-3,5-dimethyladmantane 中文名: 分子式:C14H23NO 度:98.0% 小鼠CD3分子elisa試劑盒 小鼠CD3分子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠CD3分子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠CD3分子試劑盒、小鼠CD3分子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Memantine 中文名:鹽酸美金剛胺 分子式:C12H22ClN 度:98.0% 小鼠β-防御素elisa試劑盒 小鼠β-防御素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠β-防御素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β-防御素試劑盒、小鼠β-防御素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Valdecoxib 中文名:帕瑞考昔 分子式:C16H14N2O3S 度:98.0% 小鼠肝炎病毒elisa試劑盒 小鼠肝炎病毒試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠肝炎病毒試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肝炎病毒試劑盒、小鼠肝炎病毒elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Parecoxib 中文名:帕瑞考昔鈉 分子式:C19H17N2NaO4S 度:98.0% 豬病毒Aelisa試劑盒 豬病毒A試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬病毒A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬病毒A試劑盒、豬病毒A elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Benzyl carbamate 中文名:氨基甲酸芐酯 分子式:C8H9NO2
小鼠IP-10(mouse IP-10) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benzyl carbamate 621-84-1 中文名:氨基甲酸芐酯 分子式:C8H9NO2 度:98.0%
小鼠IgM(mouse IgM) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benzyl 4-hydroxybenzoate 94-18-8 中文名:4-羥基苯甲酸芐酯 分子式:C14H12O3
小鼠IgM 英文名稱: immunoglobulin M 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgM Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate 中文名: 分子式:C16H19NO5S 度:98.0%
小鼠IgG(mouse IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benzyl 4-hydroxybenzoate 94-18-8 中文名:4-羥基苯甲酸芐酯 分子式:C14H12O3 度:98.0%
高首鱘虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格HCH-c 人軟骨細(xì)胞 500,000cells 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)100克
5637, 人細(xì)胞1-安;α-安;α-安基;1-安基 1-NcphthylcMinq;Ncphthclidinq;1-NcphthclqncMinq;α-NcphthylcMinq 134-3-7
SERPINB10 Others Mouse 小鼠 SerpinB10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) CATC瓊脂100毫升
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293DL-MALICACIDDL-蘋果酸*白色粉末RTsigma
HCCLM3細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞系,HNE2-LMP1/2細(xì)胞 CL-0354HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×21874-62-03-乙氧基-1,2-3-ETHOXY-1,2-PROPANEDIOL
AD293細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞,EB(NBL-4)細(xì)胞 CL-0303PATU8988(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-Leu-OHN-芴甲氧羰基-L-亮酸100克特,98.5%
A-498(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23,4-亞基二氧基本安 3,4-(Mqthylqnqdioxy)cnilinq 1468-66-7
HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細(xì)胞(HNEpC) 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)EosinYwo7iumsaltwatersoluble伊紅Y(水溶) 1克BR,98%
膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1-Hexanol1-100毫克BR,98%
LTA4H Others Mouse 小鼠 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 106-34-3醌氫醌;本醌合本二酚;對(duì)本醌合對(duì)本二酚inonexy7none;Molecular coMp.of p-benzoinoneone and xy7noinoneone;2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione coMpd with 1,4-benzene diol(1∶1)
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。