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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4490
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4490
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書

Trionyx Sinensis   Spherovirus(TSSV)PCR

BKP4490

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

Benzoyleneurea  中文名:亞苯甲?;?/span>  分子式:C8H6N2O2  度:98.0%  小鼠激酶(PK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

N-Benzylmaleimide  中文名:N-芐基馬來  分子式:C11H9NO2  度:98.0%  小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Benzyl nicotinate  中文名:煙酸芐酯  分子式:C13H11NO2  度:98.0%  小鼠標志物(CA724)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

(R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol  中文名:(R)-(+)-1,1'-聯(lián)-2-萘酚  分子式:C20H14O2  度:98.0%  小鼠凝血因子Ⅱ(F)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

5-Benzyl L-glutamate  中文名:L-谷氨酸5-芐酯  分子式:C12H15NO4  度:98.0%  小鼠基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
維生素B2/核黃素   英文名稱:   Human Vitamin B2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   VB2  Androstadienedione  897-06-3  中文名:1,4-雄烯二酮  分子式:C19H24O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

維生素B2VB2)檢測   Detection of malic dehydrogenase  Androstadienedione  中文名:1,4-雄烯二酮  分子式:C19H24O2  度:98.0%

維生素B1VB1)檢測   The total amino acid (TAA) detection  Androstanolone 17-benzoate  1057-07-4  中文名:雄諾龍苯甲酸酯  分子式:C26H34O3 

微量游離血紅蛋白測試盒   ace free hemoglobin test case                 Retigabine  150812-12-7  中文名:瑞替加濱  分子式:C16H18FN3O2 

微量游離血紅蛋白(FHb)測定試劑盒(比色法)  Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  中文名:  分子式:C28H42N6O8S2
中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書HUVEC pre-screened Pellet 人臍內(nèi)皮細胞(預選型) > 1 mio.cells 角質(zhì)細胞培養(yǎng)基KM-acf沒食子酸一水物質(zhì)量規(guī)格:>98%,ARGallic acid monohydrate

CL-0389NCI-H1688(人典型小細胞細胞)5×106cells/瓶×21-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRa-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate

S100A4 Others Mouse 小鼠 S100A4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫氧化鈣(>95%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCalcium hydroxide

人無色素睫狀上皮細胞總RNAHNPCEpiC NAN-甲基糠酰羥1(>99.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)N-Methylfurohydroxamic Acid

大耳山羊肺細胞;LDG-1 大鼠主動脈平滑肌細胞,A10細胞 BNL1ME A.7R.1細胞,BALB/C小鼠肝上皮細胞2,2'-二辛可寧酸二鉀鹽水合物(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate
人成纖維細胞-心房HCF-aa氟氯西林鈉(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標準品Flucloxacillin

EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 巴利森苷A;派立辛質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Parishin A

非洲綠猴腎細胞;CV-1山楂酸,馬斯里酸質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Maslinic acid

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細胞,QG-56細胞 E14細胞,129小鼠ES細胞2-并咪唑-5-磺酸,紫外線吸收劑 UV-T質(zhì)量規(guī)格:>98%2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid

KM3, 人細胞 Human3,4-二甲氧基肉桂酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品3,4-Dimethoxycinnamic acid
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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