產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4539 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
同白斑綜合癥病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | White Spot Syndrome Virus(WSSV,MBV)PCR | BKP4539 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:同白斑綜合癥病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Cefixime 79350-37-1 中文名:頭孢克肟 分子式:C16H15N5O7S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血酶敏感蛋白-1 英文名稱: thrombospondin 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TSP-1
Cefcapene pivoxil 147816-24-8 中文名:鹽酸頭孢卡品酯 分子式:C23H32ClN5O9S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠調(diào)節(jié)蛋白 英文名稱: thrombomodulin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TM
Caudatin 38395-02-7 中文名:告達(dá)庭 分子式:C28H42O7 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 小鼠TH糖蛋白 英文名稱: Mouse Tamm Horsfall Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: THP
Catalponol methylthiomethyl ether 1432057-74-3 中文名: 分子式:C17H22O2S 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 四氫萘酮; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗酸性0酸酶5 英文名稱: Mouse Tarate Resista Acid Phosphatase 5 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AP 5
Catalponol 34168-56-4 中文名: 分子式:C15H18O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 梓; 四氫萘酮; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠IgG 英文名稱: immunoglobulin G 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgG Benzyl 4-bromophenyl ketone 2001-29-8 中文名:芐基4-溴代苯基酮 分子式:C14H11BrO
小鼠IgE 英文名稱: immunoglobulin E 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgE Benzyl 4-bromophenyl ketone 2001-29-8 中文名:芐基4-溴代苯基酮 分子式:C14H11BrO 度:98.0%
小鼠IgA(mouse IgA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate 58168-20-0 中文名: 分子式:C12H14N2O4S
小鼠GRO(mouse GRO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate 1738-76-7 中文名: 分子式:C16H19NO5S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Chloramphenicol 中文名:氯霉素 分子式:C11H12Cl2N2O5 度:98.0%
同白斑綜合癥病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)HCPEpiC細(xì)胞,人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞 小鼠瘤細(xì)胞,Nb2-11細(xì)胞 人前脂肪細(xì)胞-皮下cDNAHPA-s cDNA人參皂苷Ro(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ginsenoside Ro
PLC/PRF/5(人亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2肉豆蔻木脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Myrislignan
DLD-1(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2肉桂醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cinnamyl alcohol
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12肉桂醛(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:GC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品Cinnamaldehyde
MCAM Others Mouse 小鼠 CD146 / MCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人參皂苷Rg5質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,對(duì)照品GinsenosideRg5
PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍生物技術(shù)級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
人巨細(xì)胞細(xì)胞株;Mo7e2′-脫氧尿苷-5′-... 2′-Deoxyuridine 5′-triphosphate sodi... 102814-08-4 25MG 通用試劑
TNFRSF1B Others Human 人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B (aa 1-268, 196 Met/Arg) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 六基二硅氮烷 Hqxcmqthyldisilczcnq
mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞TRYPANBLUESOLUTION,0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液,0.4%組織培養(yǎng)級(jí)100MLCOLD
NIH3T3細(xì)胞,NIH SWISS小鼠胚細(xì)胞 人細(xì)胞,ALVA細(xì)胞 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞RNAHASMC miRNA5 μg911-77-3Nα-本酰-DL-精酸-4-硝基本胺鹽酸鹽(-20℃)N-Benzoyl-DL-arginine-4-nitnoanilide xy7nochloride