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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P63345 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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諾卡菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
50T |
BK-P63345 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
兔生成素2elisa試劑盒 兔生成素2試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔生成素2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（分裝），產(chǎn)品別名：兔生成素2試劑盒、兔生成素2 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 2516-95-2 中文名： 分子式：C7H4ClNO4 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
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兔生成素2(ANG-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5α-Androstane-3β,17β-diol 571-20-0 中文名：5α-雄烷二醇 分子式：C19H32O2
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（分裝），產(chǎn)品別名：兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 2516-95-2 中文名： 分子式：C7H4ClNO4
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyloxyindole 1215-59-4 中文名：5-芐氧基吲哚 分子式：C15H13NO
PADI4 Others Human PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽H-Leu-OEt·HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%
615小鼠株;Ca763L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽H-Phe-OEt.HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞，小鼠原成骨細(xì)胞 細(xì)胞系,LM-6細(xì)胞 CL-0112HMy2.CIR(B母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甘氨酸乙酯鹽酸鹽Glycine ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHLL-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-甲硫氨酸乙酯鹽酸鹽L-Mine ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%(T),BR
TNFRSF1A Others Human TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽L-Tyrosine
ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格：0.98
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢磺啶鈉Cefsulodine 質(zhì)量規(guī)格：Cefsulodine> 864μg /mg,BR
CM-R106大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鄰苯二o-Phthalaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
KYSR450細(xì)胞，細(xì)胞 XG惡性細(xì)胞,SF-295細(xì)胞 豬內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01醋酸美倫孕酮; 甲1雌醇乙酸酯Melengestrol acetate質(zhì)量規(guī)格：USP
CHL(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2膽酯酶;膽甾醇酯酶Cholesterol esterase 質(zhì)量規(guī)格：>300 U/mg,進(jìn)分
CD27 Others Human CD27 / TNFRSF7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,9-吡唑并蒽酮;SP600125SP600125質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進(jìn)分,JNK抑制劑
其它天然產(chǎn)物 兔子葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Taxilluside A 中文名： 分子式：C18H24O10 度：97.5% 兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
n-Butyl β-D-fructofuranoside 中文名：基-β-D-果糖苷 分子式：C10H20O6 度：97.0% 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Palmitone 中文名：棕櫚酮 分子式：C31H62O 度：98.0% 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 中文名： 分子式：C18H30O3 度：95.0% 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
