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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P63538 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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卵形PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63538 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣 Aurantio-obtusin 67979-25-3 中文名：橙黃決明素 分子式：C17H14O7
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣 4,4'-Dimethoxytrityl chloride 中文名：4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷 分子式：C21H19ClO2 度：98.0%
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣 Aurantio-obtusin 67979-25-3 中文名：橙黃決明素 分子式：C17H14O7 度：99.0% 關(guān)鍵詞： 決明; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣 4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine 28783-41-7 中文名： 分子式：C7H10ClNS
線粒體復(fù)合物V蛋白共沉淀分析試劑盒5次
2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine 89282-12-2 中文名： 分子式：C5H4N2O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
MERTK Others Mouse 小鼠 MERTK / Mer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯代丁二乙(>98%,BR)NCS,
N-Chlorosuccinimide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
CL-0233THP-1(髓系單核細(xì)胞)5×106cells/瓶×2n-Dodecyl-b-D-thiomaltosiden-Dodecyl-b-D-thiomaltoside質(zhì)量規(guī)格：BR
HUM, 正常主動脈平滑肌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞，Y2細(xì)胞 NK-92MI(惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞)1,5-二氨基萘(>98%,BR)1,5-Diaminonaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
急性T細(xì)胞性細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)1,5-二羥基萘(>97%,BR)1,5-Dihydroxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
DDR1 Others Human DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,6-二羥基萘(>98%,BR)1,6-Dihydroxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 萘酚ASNaphtholAS質(zhì)量規(guī)格：0.97
侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2C蒽酮(AR)Anthrone質(zhì)量規(guī)格：AR
9204細(xì)胞，細(xì)胞 大鼠嗜堿性細(xì)胞細(xì)胞,RBL-2H3細(xì)胞 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1硫代米氏酮Thiomichler's ketone質(zhì)量規(guī)格：AR
MDA-MB-231(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2茚三酮，一水Ninhydrin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,AR
Promocell C-22120 Endothelial Cell
GrowthMedium MV KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV套裝 500ml菲尼酮Phenidone質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
m-Anisic acid
中文名：間茴香酸 分子式：C8H8O3 度：98.0% 小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate 中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯 分子式：C12H14N2S3 度：98.0% 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISAKit ELISA. 96T/48T
p-Anisoin 中文名：對茴香偶姻 分子式：C16H16O4 度：98.0% 小鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Benzoin 中文名：安息香 分子式：C14H12O2 度：98.0% 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
卵形PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)3-Benzalphthalide 中文名：3-亞芐基苯酞 分子式：C15H10O2 度：98.0% 小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
