產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63458 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
副溶血弧菌TLH/ TDH /TRH基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63458 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 中文名: 分子式:C10H14N2O6S3 度:98.0%
兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Adynerigenin β-neritrioside 88721-09-9 中文名: 分子式:C42H64O17
兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate 340702-68-3 中文名: 分子式:C50H93NO9 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Adrenosterone 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0%
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISAKit ELISA.
96T/48T Adrenosterone 382-45-6 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
NHDF-c 正常皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF)來(lái)自少年者 x500,000cells 氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)曲拉通X-100Triton X-100質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4D-葡萄糖醛酸D-Glucuronic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-別蘇氨酸L(+)-allo-Threonine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
食管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-醋酸賴氨酸Lysine acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
3T3 swiss細(xì)胞,swiss鼠胚胎成纖維細(xì)胞
癌細(xì)胞,MB-271細(xì)胞 LDH細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒LDHL-胱氨酸二甲酯二鹽酸L-Cystine dimethyl ester di質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0923 腦動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL西地尼布馬來(lái)酸鹽Cediranib Maleate 質(zhì)量規(guī)格:度> 99%
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16-F1西他列汀Sitagliptin質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 維達(dá)列汀;維格列汀Vildagliptin質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
LOVO 細(xì)胞維達(dá)列汀;維格列汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Vildagliptin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
MCF7 [MCF-7]癌細(xì)胞 MCF7 human
breast cancer cell line [MCF-7] 1640+10% FBS鄰乙酰水楊酸/阿司匹林Acetylsalicylic acid質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
Methyl
3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate 中文名: 分子式:C22H19N3O2 度:98.0% 小鼠8異素elisa試劑盒 小鼠8異素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠8異素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠8異素試劑盒、小鼠8異素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione 中文名: 分子式:C23H29NO4 度:98.0% 小鼠8羥基脫氧鳥苷elisa試劑盒 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒、小鼠8羥基脫氧鳥苷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Deflazacort 中文名:地夫可特 分子式:C25H31NO6 度:98.0% 小鼠6素elisa試劑盒 小鼠6素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠6素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠6素試劑盒、小鼠6素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Cortisone acetate 中文名:醋酸可的松 分子式:C23H30O6 度:98.0% 小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥苷酸(mouse 8-OHdG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Hydroxyprogesterone 中文名:羥孕酮 分子式:C21H30O3 度:98.0% 小鼠食欲素A(mouse Orexin A) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
副溶血弧菌TLH/ TDH /TRH基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR