產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63470 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63470 |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-Acetylbutyrolactone 中文名:2-乙?;?nèi)酯 分子式:C6H8O3 度:98.0%
豚鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit 2-Acetyl-6-methoxynaphthalene 3900-45-6 中文名:6-甲氧基-2-乙酰萘 分子式:C13H12O2 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL10 ELISA Kit 2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione 中文名:2-乙?;?span>-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮 分子式:C10H7NO3 度:93.0%
豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1 ELISA Kit 2-Acetonaphthone 1993/8/3 中文名:2'-萘乙酮 分子式:C12H10O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名:N-乙酰氨基葡萄糖 分子式:C8H15NO6 度:99.0%
*細(xì)胞裂解物HHL乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:2~8℃1.5克
UACC812細(xì)胞,導(dǎo)管瘤細(xì)胞 鼠腹水瘤,EAC-E2G8細(xì)胞 腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)4-基-2,6-二肖基酚 2,6-bqnzcldqhydq 606-31-2
BEL-7405(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鉬嶙酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium phosphomolybdate hydrate,級(jí)別:BR,95%,規(guī)格:500克
HPASMC Pellet 肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells *細(xì)胞裂解物HHLAMMONIUMSULFATE胺超級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
CL-0154MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2122-97-43-本基-1-;γ-本;氫化肉桂醇;3-本;γ-羥基丙基本3-pxenyl-1-propanol;xy7nocinnaMic alcohol;xy7nocinnaMyl
alcohol;3-pxenylpropanol;3-pxenylpropyl alcohol;γ-xy7noxypropylbenzene
EFNA5 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)對(duì)氨基水楊酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Aminosalicylate Dihydrate質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測(cè)定用
A875(色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1亞甲藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品)Methylthioninium Chloride Trihydrate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
慢性髓系細(xì)胞;K562華法林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Warfarin 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測(cè)定用
CSF1R Others Mouse 小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 華法林鈉Warfarin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
C57BL/6小鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6
mouse adipose mesenchymal stem cells洛莫司?。?biāo)準(zhǔn)品)Lomustine質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測(cè)定
Mefenamic acid
中文名:甲滅酸 分子式:C15H15NO2 度:98.0% 小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子 英文名稱:
granulocyte-macrophage colony-stimulating factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
GM-CSF
Fenofibric acid 中文名:非諾貝特酸 分子式:C17H15ClO4 度:98.0% 小鼠C-反應(yīng)蛋白elisa試劑盒 小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒、小鼠C-反應(yīng)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Dexamethasone-17-acetate 中文名:醋酸地塞米松 分子式:C24H31FO6 度:98.0% 小鼠CXC趨化因子受體elisa試劑盒 小鼠CXC趨化因子受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠CXC趨化因子受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠CXC趨化因子受體試劑盒、小鼠CXC趨化因子受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Ketoconazole 中文名:酮康唑 分子式:C26H28Cl2N4O4 度:98.0% 小鼠CXC趨化因子配體elisa試劑盒 小鼠CXC趨化因子配體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠CXC趨化因子配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠CXC趨化因子配體試劑盒、小鼠CXC趨化因子配體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)Troxerutin 中文名:曲克蘆丁 分子式:C33H42O19 度:98.0% 小鼠c-foselisa試劑盒 小鼠c-fos試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠c-fos試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠c-fos試劑盒、小鼠c-foseisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。