產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63374 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
腸道病毒70型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63374 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-Aminouracil 873-83-6 中文名:6-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0%
兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Benzyloxypurine 57500-07-9 中文名:6-芐氧基嘌呤 分子式:C12H10N4O
兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-Aminouracil 873-83-6 中文名:6-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2
兔子白介素10(IL-10)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Benzyloxyindole 中文名:6-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-Aminoquinoxaline 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 度:98.0%
CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 丙位庚內(nèi)酯(Standard for GC ,>98.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC ,>98.5%(GC)γ-Heptalactone
HAL-01 急性混合型細(xì)胞(+)-葑酮(standard for GC, ≥99.5% (GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC, ≥99.5% (GC)(+)-Fenchone
HCT-8 [HRT-18]回盲細(xì)胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%Tricyclazol solution
TNFSF11 Protein Mouse 重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%Trifluralin solution
肺間充質(zhì)干細(xì)胞(肺)(HPMSC)(5×105) U251細(xì)胞 Human草達(dá)津(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Trietazine
CMA1 Others Human CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 活性炭(電鍍脫色,200目,from
wood)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:電鍍脫色,200目,from wood
草魚腎細(xì)胞;GIK活性炭(催化劑載體,8-16目)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:催化劑載體,8-16目
T24細(xì)胞,膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 高分化鱗癌細(xì)胞,HCC細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0908活性炭(凈水、氣體化,棒,φ1.0mm)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體化,棒,φ1.0mm
615小鼠滑膜瘤株;ZM755活性炭(凈水、氣體化,10-24目)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體化,10-24目
SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 活性炭(電鍍脫色,40-60目,from Nutshell)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:電鍍脫色,40-60目,from Nutshell
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 中文名: 分子式:C11H13N3S 度:98.0% 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 中文名: 分子式:C19H16FNO 度:98.0% 兔子壞死因子α(TNF-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN 度:98.0% 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 中文名: 分子式:C21H16FNO 度:98.0% 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類elisa試劑盒 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來腸道病毒70型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒、兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Pitavastatin ethyl ester 中文名: 分子式:C27H28FNO4 度:98.0% 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3elisa試劑盒 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒、兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR