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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

英文名稱   Anti-phospho-PIK3R2(Tyr467)
中文名稱  磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗體
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit 
產(chǎn)品類型     一抗 磷酸化抗體
別    名  PIK3R2(phospho Y467); p85 antibody p85 beta; p85-BETA; P85B; P85B_HUMAN; Phosphatidylinositol 3 kinase; Phosphatidylinositol 3 kinase regulatory beta subunit; Phosphatidylinositol 3 kinase regulatory subunit beta; Phosphatidylinositol 3 kinase regulatory subunit polypeptide 2; Phosphatidylinositol 3-kinase 85 kDa regulatory subunit beta; phosphatidylinositol 3-kinase; Phosphatidylinositol 3-kinase regulatory beta subunit; Phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit beta; Phosphoinositide 3 kinase regulatory subunit 2 (beta); Phosphoinositide 3 kinase regulatory subunit 2; Phosphoinositide 3 kinase regulatory subunit polypeptide 2 (p85 beta); Phosphoinositide 3 kinase regulatory subunit polypeptide 2; Phosphoinositide 3 kinase, regulatory subunit 2 (beta); PI3 kinase p85 beta subunit; PI3 kinase p85 subunit beta; PI3-kinase regulatory subunit beta; PI3-kinase subunit p85-beta; PI3K; PI3K regulatory subunit beta; PIK3R 2; PIK3R2; polypeptide 2 (p85 beta); PtdIns 3 kinase p85 beta; PtdIns-3-kinase p85-beta; PtdIns-3-kinase regulatory subunit beta; PtdIns-3-kinase regulatory subunit p85-beta.
研究領(lǐng)域   免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
蛋白分子量   predicted molecular weight: 82kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PIK3R2 around the phosphorylation site of Tyr467
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備過程：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準(zhǔn)備：
經(jīng)常使用的抗原有：偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強(qiáng)其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類型、節(jié)約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別：
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物）刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，有機(jī)體漿細(xì)胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴(kuò)散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴(kuò)24 小時后觀察結(jié)果。 

實驗原理：
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е?。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
（2）活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。 
（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在 上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
紫丁香酚苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Syringin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品  犬抑制素β-B(Inhbb)試劑盒 Canine inhibin beta-B,Inhbb ELISA Kit  人內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

竹節(jié)參皂苷IVa（標(biāo)準(zhǔn)品）chikusetsu saponin Iva質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用  英文名稱MouseBTCELISAKit小鼠BTCELISAKit規(guī)格：96T/48T  豬生長激素受體(GHR)試劑盒 Pig growth hormone receptor,GHR ELISA Kit

毛蘭素（標(biāo)準(zhǔn)品）3'-Hydroxy-3,4,4',5-tetraMethoxybibenzyl質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用  冰凍切片組織組蛋白H3-K9甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20  HumanIerleukin17,IL-17ELISAKit 人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

石斛酚（標(biāo)準(zhǔn)品）dendrophenol質(zhì)量規(guī)格：鑒別  RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISA試劑盒大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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rabbitTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1072-93-1表告依春   epigoitrin

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