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免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

英文名稱   Anti-Patched/PTCH
中文名稱  Patched/PTCH抗體
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應   Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit 
產(chǎn)品類型     一抗
別    名  PTC1; A230106A15Rik; BCNS; FLJ26746; FLJ42602; Holoprosencephaly 7; HPE7; mes; NBCCS; OTTHUMP00000021709; OTTHUMP00000021710; Patched; Patched (Drosophila) homolog; Patched 1; Patched homolog (Drosophila); Patched homolog 1 (Drosophila); Patched homolog 1; Patched protein homolog 1; PTC; PTC1; PTCH; PTCH protein +12b; PTCH protein +4'; PTCH protein -10; PTCH protein; PTCH1; PTCH1 protein; PTCH11; Ptch2.
研究領域    細胞生物 發(fā)育生物學 神經(jīng)生物學 信號轉導 干細胞 轉錄調節(jié)因子
蛋白分子量   predicted molecular weight: 161kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Patched/PTCH N-terminus
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備過程：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準備：
經(jīng)常使用的抗原有：偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節(jié)約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫應答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別：
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物）刺激機體產(chǎn)生免疫反應，有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴24 小時后觀察結果。 

實驗原理：
（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 
（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在 上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒構建穩(wěn)定株)小鼠細胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS石英砂(AR,6-10目或2-3mm)Sand質量規(guī)格：AR,6-10目或2-3mm

TNFSF11 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 標簽)石英砂(AR,8-16目或1-2mm)Sand質量規(guī)格：AR,8-16目或1-2mm

人主動脈平滑肌細胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞 Human1酸二氫銨(SP)Ammonium phosphate monobasic質量規(guī)格：SP

小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH2二甲基亞砜(光譜級，>99.9% (GC))Dimethyl sulfoxide質量規(guī)格：光譜級，>99.9% (GC)

人脊髓星形膠質細胞(HA-sp)(1×106)N,N-二甲基乙酰胺(光譜級,≥99.8%(GC))N-N-Dimethylacetamide質量規(guī)格：光譜級,≥99.8%(GC)
SUME-a細胞，人細胞系 大鼠細胞,RH-35細胞 CM-H087人內皮細胞完全培養(yǎng)基100mLBoc-L-天冬氨酸 4-芐酯 Boc-L-Asp(OBzl)-OH質量規(guī)格：>98%,BR

P19(小鼠) 5×106cells/瓶×2Boc-L-天冬氨酸 4-環(huán)己酯 Boc-L-Asp(OcHex)OH質量規(guī)格：>98%,BR

Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪細胞生長培養(yǎng)基套裝 500mlBOC-β-丙氨酸Boc-?-Ala-OH質量規(guī)格：>98.5%,BR

腦膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(R)-N-BOC-3-代丙氨酸甲酯Boc-?-iodo-Ala-OMe質量規(guī)格：>95%,BR

RBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) BOC-D-精氨酸鹽酸鹽Boc-Arg-OH·HCl·H2O質量規(guī)格：BR
TJ905細胞，人細胞 惡臭假單胞菌 人肺間充質干細胞總RNAHPMSC NA大豆卵1脂(高)質量規(guī)格：HPLC>98%,BRLecithin

Romas(人瘤細胞) 5×106cells/瓶×2蛋黃卵1脂質量規(guī)格：BRLecithin from egg

H4-IIE(大鼠細胞 ) 5×106cells/瓶×2 CL-0337FO(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2 新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE維蘭特羅質量規(guī)格：>98%,吸入型長效β2激動劑Vilanterol;GW642444

野生型人c-kit受體細胞株;A7dPD98059質量規(guī)格：>98%,MEK抑制劑PD-98059

7130 人絨毛間葉成纖維細胞(HVT)( 5×105 )霉酚酸β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格：美國進口Mycophenolic Acid β-D-Glucuronide
Patched/PTCH抗體直銷IL7R Others Human 人 IL7Rα / CD127 人細胞裂解液 (陽性對照) TMEDA延胡索酸0.25毫升高，99%

人虹膜色素上皮細胞RNAHIPEpiC miRNA5 μgN-乙基-N-(3-磺基... N-Ethyl-N-(3-sulfopropyl)-3-methylanil... 40567-80-4 250MG 通用試劑

LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 基炳1醋縮水甘油酯， 95% Glycidyl Mqthccrylctq;Mqthccrylic ccid 2,3-qpoxypropyl qstqr;2-Mqthyl-2-propqnoicccid oxircnylMqthyl qstqr;GMc 106-91-

人心室肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLPROACTMEMBRANESTAIN蛋白膜染色試劑蛋白組學級紅色/ 棕色液體RTsigma

PC-12細胞，大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化) 22RV1(細胞) 人細胞;SMMC-772125296-54-2酚酞　絡合指示劑pxenOLPHTHALEIN COMPLEXONE

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