本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
貨號
|
|
病毒H3N2亞型PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）
|
50T
|
BK-P63214
|
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D) 作用： ELISA
規(guī)格： 96T 美國 R&D Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 171422-82-5
中文名： 分子式：C56H90O19 度：97.5% 關(guān)鍵詞： 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D) 作用： ELISA
規(guī)格： 48T/96T
進(jìn)口分裝 Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside 中文名： 分子式：C56H90O19 度：98.0%
內(nèi)皮生長因子 C(VEGF-C) 作用： ELISA
規(guī)格： 96T 奧地利 Bender Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 中文名： 分子式：C56H90O19
內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A) 作用： ELISA
規(guī)格： 96T 奧地利 Bender Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 中文名： 分子式：C56H90O19 度：97.5%
內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A) 作用： ELISA
規(guī)格： 48T/96T
進(jìn)口分裝 Androstanolone 17-benzoate 中文名：雄諾龍苯甲酸酯 分子式：C26H34O3
TNFSF13B Others Human BAFF / TNFSF13B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 試劑質(zhì)量規(guī)格：ARDithizone
tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3鎂試劑I質(zhì)量規(guī)格：ARMagnesonI
CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鉭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlTantalum
standard
BT474 導(dǎo)管癌細(xì)胞碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlTellurium
standard
WI-38胚肺細(xì)胞 WI-38 in human embryo lung
cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鋱標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCl)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:10%HClTerbium
standard
293E(胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of
cells包裝：500/250/100ml精胺氮氧化加合物Spermine NONOate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞HVCEC精胺二1酸鹽Spermine
diphosphate salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
PDE2A Others Human
PDE2A / CGS-PDE (aa 215-900) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雷尼替丁-N,S-二氧化物Ranitidine-N,S-dioxide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7去甲基雷尼替丁Desmethyl Ranitidine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
Ha Fe細(xì)胞，羊膜細(xì)胞 高分化腺癌細(xì)胞系,THC-8307細(xì)胞 CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL雷尼替丁N-氧化物Ranitidine
N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
6-Aminoindole
中文名：6-氨基吲哚 分子式：C8H8N2 AmmoniumChloride 500g
6-Aminoindazole 中文名：6-氨基吲唑 分子式：C7H7N3 乙二醇-雙-(2-基乙基)四乙酸 10g
6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S EGTA
50g
病毒H3N2亞型PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone 中文名：6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮 分子式：C9H9NO3 伊紅Y 25g
6-Amino-1-methyluracil
中文名： 分子式：C5H7N3O2 EosinY,Salt 10x25g
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
