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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P64740 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實赭曲霉 綠色木霉=木素木霉
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis 魯氏酵母 甜醬酵母
銅綠假單胞菌ATCC27853凍干粉 魯氏酵母 醬油酵母
出芽短梗霉 羅斯酵母
煙酸芽孢桿菌 蘇云金芽胞桿菌云南亞種Bacillusthuringiensissubsp.yunnanensis
長野解普魯蘭桿菌 紫晶口磨
(薩氏曲霉)
驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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鴨病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64740 |
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
鴨病毒染料法熒光定量PCR試劑盒5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2四環(huán)素鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：Tetracycline HC1，級別：BR，96-100%，規(guī)格：100毫克
HGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO細胞裂解液 (陽性對照) 氘代本并[A]芘 98 ATOM % D BqNZO[c]PYRqNq-D12 63466-71-7
人食道平滑肌細胞裂解物HESMCL癌散，英文名或英文縮寫：8-Azaguanine，級別：USP級，95%，規(guī)格：5毫克
水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T細胞細胞，Jurkat,Clone E6-1細胞 MPC-83細胞，小鼠*腺泡細胞癌細胞γ,γ-聯(lián)，英文名或英文縮寫：4,4'-Bipyridine，級別：AR，99%，規(guī)格：1克
人肝永生化細胞;THLE-3MOPS 25g/100g/500g/1Kg原裝 Amresco 0670
腎實質(zhì)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)纖維素酶(酶活>45 U/mg)Cellulase質(zhì)量規(guī)格：酶活>45 U/mg，BC
3T6swiss細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 癌細胞,M453細胞 谷胱甘肽過氧化物酶分析試劑盒GPXDL-脯氨酸DL-Proline質(zhì)量規(guī)格：0.99
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1DL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽DL-Alanine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：0.98
IL13RA2 Others Human IL13RA2 / IL13R 細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸5乙酯H-Glu(OEt)-OH質(zhì)量規(guī)格：0.985
牛腎細胞;MDBK(NBL-1)N-乙酰-DL-亮氨酸N-Acetyl-DL-leucine 質(zhì)量規(guī)格：0.98
原代內(nèi)皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml銅片Copper sheet質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,厚度0.1-0.2cm
HT1080細胞，纖維細胞 細胞,HCE1細胞 表皮色素細胞-中色素總RNAHEM-m NA氯化亞銅(>97%,BR)Copper(I) chloride質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+化亞銅(>99%,BR)Copper (I) iodide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
FGFR4 Others Human FGFR4 / FGF Receptor 4 細胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧鳥苷5'二1酸二鈉鹽dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate di salt質(zhì)量規(guī)格：>97%，分子生物學級
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFPD-葡萄糖醛酸鈉(> 98%，BR)D-Glucuronic acid, salt,
monohydrate質(zhì)量規(guī)格：> 98%，BR
SPC-A-1細胞， 人細胞,HB細胞 tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3二甲基亞砜(Standard for GC,≥99.95%(GC))Dimethyl
sulfoxide質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.95%(GC)
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Decyl alcohol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)
PVRL2 Others Mouse 小鼠 CD112 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 琥珀酸二乙酯(standard for GC,≥99.6%(GC))Diethyl succinate質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.6%(GC)
人腦微內(nèi)皮細胞裂解物HBMECL癸二酸二乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Diethyl sebacate質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)
CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))Docosane質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.0%(GC)
