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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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霍山石斛PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P64680
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2021-01-17
  • 更新日期: 2024-12-24
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P64680
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

霍山石斛PCR試劑盒

50

BK-P64680

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,65,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

8910PM細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,EMT6細(xì)胞 腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)十六烷500毫克28

Dami(人巨核細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2十八烷基基化銨 Trimethyloctadecylammonium chloride,... 112-03-8 1G 通用試劑

HTEpC Pellet 人類氣管上皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人骨骼肌細(xì)胞cDNAHSkMC cDNA異麥芽三糖 ISOMcLTOTRIOSq 3371-20-4

CL-0066COLO 205(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2potewwiumcaonaTEANxy7noUS碳酸鉀,無水ACS級(jí)白色顆粒粉末RTsigma

FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 101-80-444-二基二本4,4'-Oxydianiline
大鼠*基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL丙硫異煙胺質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRProthionamide

BV-2小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS丙硫異煙胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Prothionamide

EREG Protein Human 重組 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Methyl Stearate

VE(內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)亞麻酸甲酯(>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Methyl Linolenate

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-2H3亞油酸甲酯(>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Methyl Linoleate
小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1氯化鍶六水Strontium chloride, hexhydrate質(zhì)量規(guī)格:AR,99%

tTA基因修飾的小鼠(B);F9-CAG-tTA-1A3 IV型膠原酶(100mL酶解緩沖液) 10mL硫酸鈣二水Calcium sulfate, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR

AGS胃腺癌細(xì)胞 Human2'-脫氧胞苷'-5'-1(dCMP)dCMP, 2'-Deoxycytidine 5'-monophosphate, free acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)

TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DSS(分子生物學(xué)級(jí))DSS質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí)

*成纖維細(xì)胞-心房HCF-aa腺苷脫氨酶(15U/mg)Adenosine deaminase from calf spleen 15U/mg質(zhì)量規(guī)格:15U/mg,進(jìn)口
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞總RNAHCPF NA丁二酸二甲酯(>99%,BR)Dimethyl succinate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二甲基甲酮鈉鹽(>97%,BR)Dimethylglyoxime  salt質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR

U87MG 人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞直接藍(lán)71(50%,BR)Direct blue 71質(zhì)量規(guī)格:≥50%,BR

CL-0307SW1116(人腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2天狼猩紅Direct red 80質(zhì)量規(guī)格:BS

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞DL-苯甘氨酸(>98%,BC)DL-alpha-Phenylglycine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
霍山石斛PCR試劑盒主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

聯(lián)系方式
手機(jī):13564080845