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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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脯氨酸脫氫酶(ProDH)測(cè)試盒微量法
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)
  • 型號(hào):100管/96樣
  • 貨號(hào):BK-S01510
  • 發(fā)布日期: 2021-03-14
  • 更新日期: 2024-12-24
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-S01510
用途 產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 100管/96樣
純度 %
CAS編號(hào)
別名 脯氨酸脫氫酶(ProDH)測(cè)試盒
分子式
是否進(jìn)口

基本信息:

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

脯氨酸脫氫酶(ProDH)測(cè)試盒微量法

微量法

100/96

BK-S01510

商品介紹:

測(cè)定意義
ProDH是存在于線粒體內(nèi)的催化脯氨酸降解的關(guān)鍵酶。脯氨酸是分布最廣泛的一種滲透物質(zhì),在脅迫條件下很多植物可以通過增加合成、減少降解而在體內(nèi)累積大量脯氨酸,降低ProDH活性對(duì)于、防止?jié)B透脅迫對(duì)植物造成傷害、、保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)具有重要意義。

測(cè)定原理:

利用異硫氰酸甲酯檢測(cè)ProDH催化的脫氫反應(yīng),600nm處吸光值的吸光值的變化反映酶活性的高低。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛 產(chǎn)品僅用于科研
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以 更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
兔阿霉素(ADR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  中文名:  分子式:C22H25N3O2 

兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-Aminoindole  中文名:5-氨基吲哚  分子式:C8H8N2 

兔S100b   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     4-Aminosalicylic acid  中文名:4-氨基水楊酸  分子式:C7H7NO3 

兔S100A6蛋白   英文名稱:   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   S100A6  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名:4-苯甲?;?3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式:C17H14N2O2  度:98.0%   

兔P-選擇素(rabbit P-selectin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名:  分子式:C7H9N3O3
胃動(dòng)蛋白2   英文名稱:   Human Gasokine 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GKN-2  enediol  521-17-5  中文名:  分子式:C19H30O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

胃蛋白酶抑制劑   5mg  anolone acetate  中文名:雄諾龍醋酸酯  分子式:C21H32O3  度:98.0%

胃蛋白酶測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣              Tetracaine   136-47-0  中文名:鹽酸丁卡因  分子式:C15H25ClN2O2 

胃蛋白酶 1:3000   25g  anolone heptanoate  33776-88-4  中文名:雄諾龍庚酸酯  分子式:C26H42O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

尾加壓素 II(Human Urotensin II)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  anolone acetate  1164-91-6  中文名:雄諾龍醋酸酯  分子式:C21H32O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:
Benzoyl-L-histidine  5354-94-9  中文名:苯甲酰基-L-組氨酸  分子式:C13H13N3O3  度:98.0%      小鼠素(Renin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Benzoyleneurea  86-96-4  中文名:亞苯甲?;?nbsp; 分子式:C8H6N2O2  度:98.0%      小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Benzoyl-DL-valine  2901-80-6  中文名:苯甲酰-DL-纈氨酸  分子式:C12H15NO3  度:98.0%      小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Benzoyl-DL-mine  4703-38-2  中文名:苯甲?;?DL-蛋氨酸  分子式:C12H15NO3S  度:98.0%      小鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Benzoyl leuco methylene blue  1249-97-4  中文名:芐酰基無(wú)色亞甲基蘭  分子式:C23H23N3OS  度:98.0%      小鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
脯氨酸脫氫酶(ProDH)測(cè)試盒微量法4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名:  分子式:C15H14O5  度:98.0%  兔中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(rabbit NE)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

Isodiospyrin  中文名:  分子式:C22H14O6  度:97.5%  兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子(rabbit NGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate  中文名:  分子式:C10H12O4  度:%  兔神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3(rabbit -3)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

16-Acetoxy-7-O-acetylhorminone  中文名:  分子式:C24H32O7  度:98.0%  兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  

α-Tocopherolquinone  中文名:  分子式:C29H50O3  度:98.0%  兔脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit A-FABP)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝
脯氨酸脫氫酶(ProDH)測(cè)試盒微量法操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

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