產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64441 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 30次 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒(SDS-PAGE專(zhuān)用) |
30次 |
BK-P64441 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3 英文名稱(chēng): cardiac muscle anscription factor GATA3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): GATA3 Androstenediol-3-acetate 1639-43-6 中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式:C21H32O3
心肌轉(zhuǎn)錄因子 4(GATA4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Nitrendipine 中文名:尼群地平 分子式:C18H20N2O6 度:98.0%
心肌營(yíng)養(yǎng)素1 英文名稱(chēng): Cardioophin-1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): CT-1 Nifuroxazide 中文名:硝呋酚 分子式:C12H9N3O5 度:98.0%
心肌營(yíng)養(yǎng)素 -1(CT-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Antipyrine 中文名:安替比林 分子式:C11H12N2O 度:99.0%
心肌肌鈣蛋白1 英文名稱(chēng):
cardiac oponin 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): CTn1
Nifedipine 中文名:硝苯地平 分子式:C17H18N2O6 度:98.0%
上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B纖維素酶質(zhì)量規(guī)格:>2000U/mgCellulase
HKC細(xì)胞,胚腎上皮細(xì)胞 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞,NR8383細(xì)胞 CL-0381MDA-MB-175VII(導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫酸軟骨素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRChondroitin sulfate
C918(眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2碳酸鈷(II)(>98~102%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98~102%,BRCobalt (II) carbonate, hydrate
HWP-c visceral 類(lèi)白前脂肪細(xì)胞(HWP)內(nèi)臟 500,000cells 腸微內(nèi)皮細(xì)胞HIMEC2'-脫氧脫氧胸苷-5'二1酸三鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級(jí)dTDP
tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02-CAG-tTA-4C5半乳糖氧化酶(酶活:> 30 U/mg,BC)質(zhì)量規(guī)格:酶活:> 30 U/mg,BCGalactose oxidase
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p71酸伐倫克林Varenicline
Tartrate質(zhì)量規(guī)格:>98%
Dami細(xì)胞,巨核細(xì)胞細(xì)胞 色素瘤,MM96L細(xì)胞 卵巢;PA-11酸伐倫克林(標(biāo)準(zhǔn)品)Varenicline Tartrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
615小鼠前瘤株;Fc1酸長(zhǎng)春瑞賓/重1酸長(zhǎng)春瑞賓Vinorelbine Tartrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR
CD40 Others Human CD40 / TNFRSF5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 重1酸長(zhǎng)春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品)Vinorelbine Tartrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
上皮細(xì)胞;Ca Ski伏立康唑Voriconazole質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 中文名: 分子式:C5H9N3O 谷胱甘肽—S轉(zhuǎn)移酶(GSH-ST)試劑盒(比色法)
5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine 中文名: 分子式:C16H14ClNO 英文名稱(chēng): Total Niic Oxide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): NO
5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C18H27N3O4 自然殺傷細(xì)胞 英文名稱(chēng): Natural killer Cells 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): NK
5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S 結(jié)核分枝桿菌抗體 英文名稱(chēng): Mycobacterium Tuberculosis Aibody 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TB
5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 中文名: 分子式:C8H8OS2 谷酰胺 英文名稱(chēng): ansglaminase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TG
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒(SDS-PAGE專(zhuān)用)主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR