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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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Ar 1193 電擊感受態(tài)細胞
起訂量 (瓶)價格
1-10￥2350 /瓶
≥10￥1250 /瓶
  • 品牌：帛科
  • 產地：進口、國產
  • 貨號：BK-G63321
  • 發(fā)布日期： 2021-02-21
  • 更新日期： 2024-12-24
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63321
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞 否
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 50ul*10 50ul*50
純度 %
是否進口 是

規(guī)格參數：

產品名稱：Ar 1193 電擊感受態(tài)細胞
規(guī)格 ：50ul*10 50ul*50
分類：發(fā)根農桿菌感受態(tài)細胞  
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀） 干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。
操作方法：
1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

原（標準品）質量規(guī)格：UV>95%,分析標準品Procyanidin  ELISAKitcTn-Ⅰ人心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格：48T/96T  凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅧ ELISA Kit

胡椒堿質量規(guī)格：HPLC>97%,BRPiperine  小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit  Rabbitoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒兔子氧化(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

透明質酸,玻尿酸(分子量80萬-150萬)質量規(guī)格：>95%,BR,M.W:80萬-150萬Hyaluronic Acid    大鼠抗內皮細胞抗體(AECA)ELISA檢測試劑盒Ratai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 96T/48T  HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISA試劑盒人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

透明質酸,玻尿酸,醣醛酸（分子量3K）質量規(guī)格：>95%,BR,M.W:3000Hyaluronic Acid    人白細胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Human ALCAM ELISA Kit  HumanComplemefragme3c，C3cELISAKit人補體片段3c(C3c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Mouse15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISA試劑盒小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  34420-19-4千金子二萜醇  Lathyrol

小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)ELISA試劑盒 ，英文名： ELA2 ELISA Kit  88206-46-6羌活醇說明書  Notopterol  

犬球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒CanineImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T  78281-02-4羥基紅花黃色素A品牌  Hydroxysafflor yellow A

犬軟骨寡聚基質蛋白(COMP)試劑盒 Dog cailage oligomeric maix protein,COMP ELISA kit  34540-22-2羥基積雪草苷規(guī)格  Madecassoside  

英文名稱HumanFree-T4ELISAKit人游離甲狀腺素(Free-T4)規(guī)格：96T/48T  18449-41-7羥基積雪草酸  Madecassic acid

484-12-8蛇床子素   Osthole  植物葡萄糖6-1酸異構酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)電泳分析試劑盒5

483-90-9毛兩面針素規(guī)格  Toddalolactone  植物尿苷二1酸葡萄糖焦1酸化酶(UDPglucosepyrophosphorylase)活性比色法定量檢測試劑盒20

483-15-8二氫小檗堿  Dihydroberberine   植物內質網粗提分離試劑盒10

Ar 1193 電擊感受態(tài)細胞482-89-3靛藍  Indigo   植物膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20

482-83-7黃檀素說明書  6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin    植物彌散吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量檢測試劑盒(包括萃取)20

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