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| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-S01321 |
| 用途 | 僅供科研使用 |
| 英文名稱 | |
| 包裝規(guī)格 | 100管/48樣 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 別名 | 輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒 |
| 分子式 | |
| 是否進口 | 否 |
基本信息：
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產(chǎn)品名稱 |
檢測方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
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輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒微量法 |
微量法 |
100管/48樣 |
BK-S01321 |
大鼠透明質酸結合蛋白(HABP)elisa檢測試劑盒
大鼠透明質酸(HA)elisa檢測試劑盒
大鼠銅藍蛋白(CP)elisa檢測試劑盒
大鼠同型半胱氨酸(Hcy)elisa檢測試劑盒
大鼠鐵蛋白(Ferritin)elisa檢測試劑盒
商品介紹：
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測定意義 輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要氫受體，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時，形成大量的ROS，同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環(huán)的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高，處于過氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調(diào)控作用。 測定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進一步采用MTT還原法檢測。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致公認是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以 更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
ANTXR2 炭疽毒素受體2抗體
ATG4C 自噬相關蛋白4C抗體
APG5L 自噬蛋白5/細胞凋亡的特異性蛋白抗體
ARSA 芳基硫酸酯酶A抗體
ACA11 擬南芥ACA11抗體
AHA3 AHA3抗體（擬南芥）
Phospho-ATP1A1 (Ser23) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
phospho-ASK1 (Ser83) 磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體
AADACL1 中性膽固醇酯水解酶1抗體
Astrocyte 人星形膠質細胞抗體
Aldolase A 醛縮酶A抗體
Annexin VI 膜粘連蛋白6抗體
beta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽（25-35）抗體
Angiotensin I 緊張素I抗體
Adrenomedullin 腎上腺髓質素抗體(N端20肽)
Arfaptin 2 ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體
AVPR2 精氨酸加壓素受體2抗體
ASC 凋亡相關斑點樣蛋白ASC抗體
Afadin 絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體
Antithrombin III 抗凝血酶3抗體
人胚；WI-38 [WI38]
人臍內(nèi)皮細胞（人細胞污染）；ECV-304 [ECV304；ECV 304]
人胚；MRC-5
人羊膜細胞；WISH
人二倍體細胞；HEL
人正常肝細胞；L-02
人胚肺細胞VA13細胞；WI-38 VA13亞系2RA
人胚肺二倍體細胞；HL
人腎皮質近曲小管上皮細胞；HK-2
人臍內(nèi)皮細胞；HUV-EC-C
人男性正常細胞；Hs68
人胚腎上皮細胞系；KiMA
人胚肺細胞系；KuMA
人永生化淋巴細胞；CNLMG-B5537LC
人類成纖維細胞系；CNLMG-B5537SKIN
人永生化淋巴細胞；CNLMG-B5538LC
人類成纖維細胞系；CNLMG-B5538SKIN
人肺轉化細胞；AE1201
人胚；MRC-5
人胚肺二倍體細胞；HEL-1
人胚腎二倍體細胞；HEK-2
人胚肺二倍體細胞；KMB-17
人胚肺二倍體細胞；HEL-2
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒微量法人胚胎皮膚成纖維細胞；HES
人皮膚成纖維細胞；HSAS4
人皮膚成纖維樣細胞；HSF2
人胚胎成纖維樣細胞；HEH2
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。
