磷脂酶A2PLA2微量法檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
測(cè)定意義:
磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂?;饷?,廣泛存在于動(dòng)植物組織、、細(xì)胞核分泌物中,參與脂肪消化,精子成熟、細(xì)胞信號(hào)傳遞、脂質(zhì)過(guò)氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過(guò)程,在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。
測(cè)定原理
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸膽堿(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿。。
Kelch樣蛋白8抗體
鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體
鉀通道蛋白1抗體
電壓門控鉀通道蛋白1抗體
微管驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1A抗體
鉀離子通道蛋白家族成員1抗體
鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體
鉀離子通道蛋白家族成員2抗體
G蛋白激活內(nèi)向鉀通道5抗體
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體
抑癌蛋白EZH2抗體
DNA修復(fù)酶Ku70抗體
DNA修復(fù)酶Ku-80抗體
14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體
腦蛋白9抗體
鉀通道相互作用蛋白2抗體
劍蛋白p60亞基A1抗體
Kazrin蛋白抗體
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體
磷酸化Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體
氯胺酮抗體
激肽釋放酶7抗體